Akademie EMS mikroskopie

Přehled kurzů

Lektoři na EMS Microscopy Academy

Michael Kostrna, Elektronová mikroskopie, Hatfield, Pennsylvania, USA

Michael byl programovým ředitelem programu Electron Microscopy Technician v Madison Area Technical College a má více než 35 let zkušeností v oblasti EM technického vzdělávání a výzkumu. Vyučuje EM studenty již 30 let a vyvinul kurikulární a laboratorní cvičení pro TEM, SEM, O LM, laboratorní bezpečnost, úvodní a pokročilou biologickou EM, EM údržbu a rentgenovou mikroanalýzu. Spolupracoval s firmami, jako jsou SC Johnson Polymer, Dow Chemicals, Io Genetics, Virent Technologies, ABS Global, NanoOnocology a Microscopy Innovations a v procesu získal zkušenosti s různými aplikacemi EM.

Kurz: Aurion Zlato – Stříbro imunoznačení

3 dny praktického výcviku pro studenty, výzkumníky a mikroskopisty, kteří se chtějí naučit nejaktuálnější teorii a praxi ve imunoznačení zlatem.

Lektoři: Peter van de Plas, Michael Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

Rozsah a zaměření kurzu

Cílem kurzu je poskytnout vědcům příležitost seznámit se s teorií a praxí imunoznačení zlatem. Účastníci zpracovávají vlastní vzorky pod odborným vedením našich lektorů, kteří jsou odborníky v technikách Immuno Gold Silver Staining. Během workshopu se návštěvníci seznámí s teorií, včetně mimo jiné imunologické detekce, in situ hybridizace, zesílení stříbrem a problémů s pozadím. Bude také čas na praxi. Účastníci budou schopni pracovat s vlastními vzorky, stejně jako s těmi, které budeme mít připravené. Kurz zahrnuje úplný přehled inkubačních metod, testování antigenicity a reaktivity, kompletní zásady imunoznačení a příprava konjugátů pro EM a LM.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako diskuse u kulatého stolu. Účastníci si mohou do laboratoře přinést své vlastní vzorky.

Vzorky musí být „připraveny k použití", např. řezy chemicky fixovaných buněk na krycím sklíčku. Pro každou kombinaci primární protilátky a konjugátu zlata, které chcete testovat během workshopu, potřebujete alespoň 3, nejlépe 4 vzorky. To umožňuje testovat různá ředění primární protilátky a kontrolovat činidla Immuno Gold / Silver (negativní kontrola). Při imunoznačení jsou do experimentu také zahrnuty vzorky, které budou imunologicky značeny pro hodnocení pod světelným mikroskopem. Tyto vzorky slouží k ověření, zda je experiment úspěšný. Během workshopu není čas ani možnost pro další zpracování vašich vzorků pro hodnocení EM. Plastové uložení a řezy musí být provedeny na vlastním pracovišti.

Kurz: Automatizované a rychlé zpracování vzorku pro elektronovou mikroskopii

Tento 3 kurz představí účastníkům používání zařízení pro zpracování tkání pro TEM.

Lektoři: Michael Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

• EMS 9000 Microwave
• Lynx II Processor
• Microscopy Innovations ASP 1000

Cíloví účastníci

Manažeři laboratoří nebo technici, kteří jsou zodpovědní za zpracování vzorků pro analýzu TEM a v současné době nepoužívají mikrovlnné trouby ani automatizovaný procesor.

Rozsah a zaměření kurzu

Příprava vzorků pro EM vyžaduje mnoho kroků s prodlouženými čekacími časy, což zabere laborantovi celý den. Tento proces se skládá z několika kroků fixace, mytí, dehydratace a pryskyřicové infiltrace, které jsou nudné a náchylné k časové variabilitě mezi běhy. Při použití automatizovaného tkáňového procesoru nebo mikrovlnné trouby se zkracuje doba provádění a získává se lepší kontinuita mezi zpracováním. Tento kurz představí účastníkům použití specializované laboratorní mikrovlnné trouby, EMS 9000 a 2 modely automatizovaných tkáňových procesorů Lynx II a Microscopy Innovation ASP 1000 pro zpracování tkání pro TEM.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a práce s použitými systémy. Diskuse o výhodách a nevýhodách spolu s otázkami účastníků jsou významnou součástí tohoto workshopu.

Kurz: Biologická SEM

Tento kurz seznámí účastníky s metodami přípravy vzorků, SEM parametry a provozem potřebným pro přesnou analýzu.

Lektoři: Michaela Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

• Hitachi S3500 SEM 
• EMS 850 Kritická bodová sušárna 
• PP3010T Systém pro kryo- přípravu 
• TES 150T ES Sputter Coater
   

Pro koho je kurz určen?

Pro ty, kteří v současné době vykonávají nebo budou odpovědni za přípravu vzorků a/nebo provoz SEM ve výzkumném, akademickém nebo průmyslovém prostředí.

Rozsah a zaměření kurzu

Příprava vzorků se zahájí stanovením ROI a následným výběrem orientace hrubého řezu a určením, jaká dehydratační technika se použije: lyofilizace, HMDS, Hitachi iontová kapalina nebo kritické bodové odsávání (CPD). Chemické zpracování požadované před CPD bude zdůrazněno. Zvláštní pozornost bude věnována orientaci, stabilitě a fixaci vzorku při vložení, aby se usnadnilo snímání. Výhody, nevýhody a požadavky na přístroje pro různé povlakové materiály: Au, Pt, Pt / Pd budou diskutovány. Volba urychlujícího napětí (kV) a velikosti bodů jsou rozhodující pro detaily povrchu, rozlišení a nabíjení budou podrobně popsány. Parametry, jako je pracovní vzdálenost pro hloubku ostrosti (Dfi) a rozlišení, plus náklon a otočení rastru, budou zkoumány pro správný sběr snímků.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako diskuse u kulatého stolu. Účastníci se vyzývají, aby si vzali své vlastní vzorky, pokud je to možné. 

Hlavní učební plán
 

Místo konání

EMS Microscopy Academy: Umístěná v Hatfield v Pensylvánii, akademie poskytuje kurzy elektronové mikroskopie, semináře a školení pro všechny oblasti mikroskopie, včetně vědy o materiálech a biologických věd.

Kurz: Biologická TEM

Teorie a praktická příprava pufrů, fixativ a dalších roztoků potřebných pro chemické zpracování biologických vzorků pro TEM.

Lektoři: Al Coritz, Michael Kostrna

Vybavení:

• Leica UC7 Ultramicrotome 
• Boeckeler Autotome 
• EMS 9000 mikrovlnná trouba
• Vakuová trouba

Cíloví účastníci 

Jednotlivci, kteří jsou nebo budou odpovědni za chemické zpracování a řezání biologických vzorků pro vyšetření TEM. 

Rozsah a zaměření kurzu

Správné chemické zpracování biologických vzorků pro pozorování TEM je nezbytné pro zachování reprezentativní morfologie a ultrastrukturálních detailů. Tento kurz bude zahrnovat pufry, fixační látky, dehydratační činidla a embedmentové pryskyřice, které se nejčastěji používají pro EM, s jejich diskutovanými individuálními výhodami a nevýhodami. Příprava těchto různých roztoků bude v případě potřeby vypočítána a provedena. Mikrovlnná trouba bude použita pro všechny kroky s výjimkou polymerace. Požadavky pro specializované protokoly při použití specifických tkání, jako je myelinovaný nerv, který vyžaduje prodlouženou infiltraci, budou diskutovány. 

Epoxidové (Embed 812) a akrylové (LR bílá) pryskyřice budou k dispozici. Schopnost TEM poskytovat rozlišení sub-nanometrů závisí zcela na tloušťce vzorku, obvykle 60 nm nebo méně. Chcete-li získat části této dimenze, potřebujete specializované vybavení, ultramikrotomy, vysoce kvalitní diamantové nože a zkušeného technika. Proces řezávání, silné řezy pro pozorování OLM, tenké řezy, výběr řezů a posouzení řezu bude hlavním cílem tohoto kurzu. Základní TEM bude zahrnovat vkládání vzorků, kondenzátor a objektivní korekci astigmatismu a kritické zaostřování.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako diskuse u kulatého stolu. Účastníci se vyzývají, aby si vzali své vlastní vzorky, pokud je to možné. 

Hlavní učební plán
 

Místo konání

EMS Microscopy Academy: Umístěná v Hatfield v Pensylvánii, akademie poskytuje kurzy elektronové mikroskopie, semináře a školení pro všechny oblasti mikroskopie, včetně vědy o materiálech a biologických věd.

Kurz: Kryo SEM

Tento kurz se bude zabývat procesem rychlého zmrazování, lámání, natírání a zobrazování různých vzorků.

Lektoři: Peter van de Plas, Michael Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

• Hitachi S3500 SEM 
• PP3010T Systém pro kryo přípravu 
• Leica UC7 Ultramicrotom 
• Leica Crion Cryomicrotom

Cíloví účastníci 

Jednotlivci, kteří jsou v oblasti kryo SEM noví, nebo si přejí technickou obnovu pro udržení současných dovedností nebo jen ti lidé, kteří chtějí vidět a naučit se všechny možnosti této technologie. 

Rozsah a zaměření kurzu

Mnoho typů vzorků, jako je zmrzlina, pasty, barvy a gely, nepodléhají rutinním metodám přípravy vzorků SEM, jako je sušení kritickým bodem nebo sušení vymražením kvůli morfologickým změnám způsobeným vysycháním. Abychom se vyhnuli těmto artefaktům, je nutné si představit hydratovaný nebo přirozený stav. To vyžaduje, aby byl vzorek rychle zmrazen, aby se snížilo poškození krystaly ledu a zlomení, aby se odhalila fyzikální / funkční morfologie pod povrchem. Tyto vzorky se aplikují na pahýl ponořený do kapalného dusíku, který je nanesen do kryogenní a povlakové komory Cryo a nakonec na SEM.

Tato konečná příprava probíhá ve vysoce vakuovém prostředí, čímž se minimalizuje možnost kontaminace mrazem. V rámci SEM se při sledování může teplota vzorku udržovat na -130 °C nebo lze mírně zahřát, aby se usnadnila sublimace povrchu. Výběr urychlovacího napětí (kV), podrobnosti o povrchu a velikost bodu pro rozlišení a nabíjení jsou kritické a budou podrobně popsány. Parametry, jako je pracovní vzdálenost, která ovlivňuje hloubku ostrosti (Dfi) a rozlišovací schopnost, a naklonění a otočení rastru, budou prozkoumány pro správný sběr snímků.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako diskuse u kulatého stolu. Účastníci se vyzývají, aby si vzali vlastní vzorky, pokud je to možné.

Hlavní učební plán

Místo konání

EMS Microscopy Academy: Umístěná v Hatfield v Pensylvánii, akademie poskytuje kurzy elektronové mikroskopie, semináře a školení pro všechny oblasti mikroskopie, včetně vědy o materiálech a biologických věd.

Kurz: Materiálová ultramikrotomie

Třídenní praktický kurz pro laboranty, výzkumníky a studenty, kteří chtějí použít rychlejší a čistější způsob přípravy, který poskytuje vzorky s rovnoměrnou tloušťkou, bez znečištění po vložení a levnější než FIB.

Lektoři: Helmut Gnaegi, Diatome Ltd.,Švýcarsko, Michael Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

Rozsah a zaměření kurzu

Představí jedinečné aplikace ultramikrotomie na materiálech, což poskytuje několik výhod oproti jiným běžným technikám, jako je iontové frézování, FIB a leštění pro analýzu TEM. Tenké řezání (≤ 30 nm) kovů, uložených prášků a polymerů je technika, která poskytuje vzorky s rovnoměrnou tloušťkou, zachováním elementárního rozložení, bez iontové implantační kontaminace a je mnohem rychlejší, než u jiných metod jako je iontové frézování, leštění a frézování FIB.

Formát

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako diskuse u kulatého stolu. Účastníci si mohou přinést své vlastní vzorky, na kterých mohou pracovat v laboratoři.

Místo konání

EMS Microscopy Academy: Umístěná v Hatfield v Pensylvánii, akademie poskytuje kurzy elektronové mikroskopie, semináře a školení pro všechny oblasti mikroskopie, včetně vědy o materiálech a biologických věd.

Kurz: Farmaceutická mikroskopie - aplikace

Tento kurz je navržen tak, aby představil hlavní aplikace mikroskopie ve farmaceutickém vývoji: polymorfismus, analýza velikosti částic, identifikace kontaminující látky a koroze skla. 

Lektoři: Robert Carlton, Michael Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

Cíloví účastníci

Tento kurz je určen pro středně pokročilé analytiky, kteří mají zkušenosti z některých oblastí mikroskopie, ale potřebují výcvik v jiných metodách a v interpretaci.

Rozsah a zaměření kurzu

Tento kurz je navržen tak, aby představil hlavní aplikace mikroskopie ve farmaceutickém vývoji: polymorfismus, analýza velikosti částic, identifikace kontaminující látky a koroze skla. Workshop probíhá po dobu tří dnů a skládá se z teorie, demonstrací a praktické práce. Kurz je určen k přípravě studentů pro aplikace mikroskopie při řešení farmaceutických problémů. Důraz je kladen na praktické použití mikroskopu.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako diskuse o tipech a tricích u kulatého stolu. Účastníci se vyzývají, aby si vzali vlastní vzorky, pokud je to možné.

Hlavní učební plán

• Polymorfismus: použití polarizovaného světla a termální mikroskopie
• Ir a Raman mikrospektroskopie
• Analýza velikosti a tvaru: pomocí OLM, SEM / EDS a fluorescence s analýzou obrazu
• Identifikace kontaminace a analýza koroze skla: použití polarizovaných a skenovacích mikroskopů
• EDS a mikrospektroskopie

Místo konání

EMS Microscopy Academy: Umístěná v Hatfield v Pensylvánii, akademie poskytuje kurzy elektronové mikroskopie, semináře a školení pro všechny oblasti mikroskopie, včetně vědy o materiálech a biologických věd.

Kurz: Farmaceutická mikroskopie - techniky

Tento kurz je určen k výuce základních technik a provozu farmaceutické mikroskopie.

Lektoři: Robert Carlton, Michael Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

Cíloví účastníci

Tento kurz pokrývá základní mikroskopické techniky používané ve farmaceutickém průmyslu a je určen pro nováčky nebo začátečníky.

Rozsah a zaměření kurzu

Mikroskopie má místo v téměř všech solidních studiích a je často kritická při řešení otázek týkajících se vývoje léků. Pro optimální využití mikroskopie je zapotřebí jak dobrých přístrojů, tak i zkušený mikroskopista. Tento kurz je určen k výuce základních technik a provozu farmaceutické mikroskopie. Nepředpokládá žádné předchozí znalosti mikroskopie, ale základní znalosti farmaceutické solidní analýzy.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako tipy a triky u kulatého stolu. Účastníci se vyzývají, aby si vzali vlastní vzorky, pokud je to možné.

Hlavní učební plán

Použití následujících technik v analýze pevných látek, tvaru a velikosti částic, identifikace kontaminantů a hodnocení skleněné koroze (delaminace):

• Stereomikroskopie
• Polarizovaná světelná mikroskopie
• Tepelná mikroskopie
• Skenovací elektronový mikroskop a EDS (energetická disperzní rentgenová spektroskopie)
• IR a Ramanova mikroskoproskopie
• Automatizovaná analýza obrazu

Místo konání

EMS Microscopy Academy: Umístěná v Hatfield v Pensylvánii, akademie poskytuje kurzy elektronové mikroskopie, semináře a školení pro všechny oblasti mikroskopie, včetně vědy o materiálech a biologických věd.

Kurz: Farmaceutická mikroskopie - polymorfismus  

Tento kurz pokrývá použití mikroskopu jak v časném farmaceutickém vývoji, kdy je forma zvolena, tak v pozdějších fázích vývoje, kdy je forma sledována pro stabilitu.

Lektoři: Robert Carlton, Michael Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

Cíloví účastníci

Tento kurz je určen pro zkušeného analytika, který je seznámen se základními znalostmi farmaceutické mikroskopie. Důraz je kladen na praktické aplikace mikroskopie v analýze polymorfismu.

Rozsah a zaměření kurzu

Volba optimální formy v pevné fázi je kritická pro úspěšný farmaceutický vývoj. Obecně definovaná forma zahrnuje polymorfní formy, hydráty, solváty, soli, co-krystaly apod. Mikroskopie je vhodná pro studium pevného stavu. Tento kurz pokrývá použití mikroskopu v raném vývoji farmaceutického průmyslu při výběru formy a v pozdějších fázích vývoje, kde je forma monitorována pro stabilitu. Pokrývá materiál v kapitole 8 Farmaceutická mikroskopie (Springer, 2011) spolu s výběry z jiných kapitol. Kurz zdůrazňuje, jak se mikroskopie používá ve spojení s dalšími analytickými technikami pro výběr formátu a analýzu.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako tipy a triky u kulatého stolu a diskuse. Účastníci se vyzývají, aby si vzali vlastní vzorky, pokud je to možné.

Hlavní učební plán

Materiál v tomto kurzu je obecně rozdělen podle fáze vývoje na objev formy a pochopení formy. K objevu formy obvykle dochází nejdříve u lidí (FTIH) ve Fázi 1. Porozumění formě se obecně vyskytuje ve fázi 1 a 2, i když některé práce se rozšiřují do fáze 3. Tento workshop zdůrazňuje roli mikroskopie v každém aspektu porozumění formy. Přestože budeme diskutovat teorii a základní principy, workshop se značně spoléhá na případové studie, demonstrace a použití nástrojů.

Místo konání

EMS Microscopy Academy: Umístěná v Hatfield v Pensylvánii, akademie poskytuje kurzy elektronové mikroskopie, semináře a školení pro všechny oblasti mikroskopie, včetně vědy o materiálech a biologických věd.

Kurz: Rentgenová mikroanalýza

Tento kurz pokrývá kvalitativní a semikvantitativní analýzy a začíná s generací pozadí a charakteristikou rentgenových paprsků, nomenklatury a poměrů píků.

Lektoři: Michael Kostrna, Al Coritz

Vybavení:

• Hitachi S3500 SEM
• Bruker Esprit

Cíloví účastníci

Jednotlivci, kteří jsou nebo budou brzy provozovat SEM, vybírat vhodné parametry pro EDS a provádět kvalitativní a semikvantitativní analýzu vzorků materiálů.

Rozsah a zaměření kurzu

Nedestruktivní elementární identifikace mikrokompozice vzorku je výkonný nástroj pro mikroskopisty. Tato technika dokáže detekovat prvky od bóru k uranu s minimální koncentrační detekcí 1000 ppm u pevných vzorků. Nastavení parametrů systému EDS a mikroskopu, jejich vliv na spektrum a na kvalitu následné kvantifikace mají primární důležitost. Neměnné parametry pracovní vzdálenosti a náklonu budou ukázány, stejně jako účinek urychlujícího napětí na tvar pozadí, x-ray prostorové rozlišení, požadavky na přepětí a přesnost ZAF matrix korekce. S nástupem křemíkového driftového detektoru (SDD), pulsová časová konstanta procesoru a nastavení proudu paprsku (velikost bodu) vůči kontrolnímu % mrtvému času jsou také bodem zájmu a budou představeny těm, kteří pracují se SiLi detektorem.

Zvláštní pozornost bude věnována identifikaci jednotlivých elementárních linií, stejně jako metodám pro určení překryvu píků, jako je tvar píků, anomálie poměru píků a přítomnost píku, který není spojen se známými prvky. Kvantitativní analýza bude omezena na použití rutinní ZAF a PhiRhoZ, ale shromažďování standardů a jejich použití v plném kvantovém bude diskutováno. Zpětně rozptýlené (BSE) zobrazování bude korelováno s rentgenovými mapami a spektrálními zobrazovacími výsledky. Kalibrace energie bude také předem vytvořena.

Formát kurzu

Přednášky, demonstrace a praktické cvičení, stejně jako diskuse u kulatého stolu. Účastníci se vyzývají, aby si vzali své vlastní vzorky, pokud je to možné.

Hlavní učební plán

Místo konání

EMS Microscopy Academy: Umístěná v Hatfield v Pensylvánii, akademie poskytuje kurzy elektronové mikroskopie, semináře a školení pro všechny oblasti mikroskopie, včetně vědy o materiálech a biologických věd.

Ukázky přístrojů

Osobní krátké kurzy

Pokud máte nápad nebo požadavek na Osobní krátký kurz, který zde není uveden, pošlete žádost online.