Přímé sekvenování kolonií

RCA Sekvenační data do 24 hodin

Použití RCA pro amplifikaci DNA urychluje proces Sanger sekvenování a umožňuje doručení vašich dat již za 24 hodin od přijetí vzorku v Azenta.

Sekvenování pomocí válcové kruhové amplifikace

 

RCA byla identifikována v přírodních systémech jako mechanismus replikace DNA často používaný při propagaci plasmidů a virů. Když jsou náhodné hexamery spojeny s DNA polymerázou s posunem vlákna, je generováno mnoho zřetězených kopií šablony bez potřeby termocyklení (Dean et al., 2001). Syntetizovaná vlákna jsou po jednom kole RCA vytlačena a jsou volná pro další kola vazby primerů. Exponenciální amplifikace je dosažitelná, pokud RCA reakce obsahuje primery komplementární k oběma vláknům šablony.

 

Vlastnosti a výhody přímého sekvenování kolonií

• Úspora času a nákladů: není potřeba kultivovat kulturu a připravovat DNA
• Vysoce kvalitní data: >600 bází Phred20 čtení
• Návrh projektu a konzultace: vysoce kvalifikovaný tým specialistů na Sanger sekvenování je k dispozici po celou dobu projektu
• Rychlé dodání: obdržíte svá Sanger data již za 24 hodin od přijetí vzorku v Azenta
• Online objednávání: 24/7 online objednávkový a datový systém
• Univerzální primery GENEWIZ: vyberte si z široké nabídky primerů dostupných bez dalších nákladů

 

Aplikace RCA sekvenování

• Klonování shRNA a screening knihoven; Eliminujte přípravy plasmidů a sekvenujte kolonie přímo.
• Analýza metylace DNA: Ušetřete čas a získejte vysoce kvalitní čtení klonováním PCR produktů přímo a sekvenováním bakteriálních kolonií.

Z

ískejte odměnu za své doporučení

Získejte 20% slevu na vaši další genomickou objednávku*

*Platí podmínky a ustanovení

 

MOŽNOSTI ODESLÁNÍ VZORKŮ

•  
• Glycerolová zásoba: Odešlete 96-jamkové destičky; vzorky musí být odeslány na suchém ledu. Označte typ média.
• Bakteriální kolonie: Uspořádejte kolonie do mřížky na agarové destičce a zakroužkujte kolonie vyžadující sekvenování. Číselně označte každou kolonii. Neoznačené destičky budou zpracovány jako náhodný výběr. Pokud používáte tekutou kulturu, odevzdejte vzorky v 96-jamkové agarové destičce s páskovými uzávěry. Zabalte agarové destičky do parafilmu a poskytněte polštářek k ochraně před možným poškozením.

 

*Upozorňujeme: Protokol RCA je určen pro kruhové šablony <10 kb; lineární šablony nebudou dostatečně amplifikovány pro přímé Sanger sekvenování. Delší kruhové šablony nebo kruhové šablony nesené v bakteriálních kmenech s funkčním endA nemusí být spolehlivě amplifikovány, což přispívá k variabilním výsledkům.

 

Navštivte naše Pokyny pro odeslání vzorků pro další podrobnosti o bakteriálních šablonách. Objednejte si naše služby u Biogenu a zažijte bezkonkurenční kvalitu a pohodlí!